|
酶聯免疫分析是體外診斷技術中使用普遍且應用時間比較久的一種分析檢測技術,其用到的設備儀器簡單,各種實驗環境下都可以操作,靈敏度也比較高,具有多方面的優勢。酶聯免疫所使用的底物除了大家熟知的ELISA中的TMB之外,還有新型Trinder’s試劑等。
色原底物新型Trinder’s試劑
新型Trinder’s試劑是在傳統Trinder’s試劑的基礎上通過官能團的取代優化改進而來,穩定性和靈敏度更好。它的種類很多,目前德晟已經研發并銷售的有9種,包括TOOS、TOPS、MAOS、ADPS等等。不同的Trinder’s試劑的氧化產物,其蕞大吸收光波長和摩爾吸光系數不一樣,分別適用于不同生化指標的檢測。
Trinder’s試劑檢測原理
Trinder’s試劑屬于HRP的氧化耦聯色原底物對,和4-氨基安替(4-AAP)比鄰耦聯氧化顯色(也可用2-甲基-2苯并噻唑啉酮腙MBTH,但應用較少)。在H202存在下,4-氨基安替比林和新型Trinder’s試劑經HRP作用縮合形成紅色的醌亞胺類物質,其在特定波長處有最大吸收,大于540nm,檢測波長紫外區,干擾少。
色原底物TMB
TMB即四甲基聯苯胺,是ELISA試劑盒中所使用的酶聯免疫底物。它屬于一種氧化還原色原底物,其氧化產物聯苯醌在波長450nm(吸收光為藍光)處有蕞大消光系數。當酶HRP量少,過氧化氫溶液和TMB過量時,則形成藍色的陽離子根,降低pH,即可使藍色的陽離子根轉變為黃色的聯苯醌。***作為終止劑可使產物穩定90min,1%SDS作為終止劑可使鮮藍色24h內保持不變,但有較強的褪色作用。
新型Trinder’s試劑與TMB相比,成本更高一些,不如TMB適用廣泛,不過它們的吸收波長要更高,MAOS試劑更是達到了630nm。除了上述的色原底物之外,德晟還可以提供檢測中所需要的各種酶制劑。