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吖啶酯(NSP-SA-NHS)Cas199293-83-9及其相關化合物已被證明是非常有優勢的化學發光標記物,其穩定性、活性和敏感性超過了某些放射性同位素。吖啶酯能與含有一級氨基的蛋白發生反應。在堿性條件下,NHS作為離去基團被取代,蛋白質與吖啶酯形成穩定的酰胺鍵。反應完成后,多余的吖啶鹽通過脫鹽柱除去。
在存在堿性過氧化氫時,吖啶標記的蛋白不需要酶催化可自行發光。具體發光原理是在堿性過氧化氫溶液中,吖啶酯受到過氧化氫離子的進攻,生成一個有張力的不穩定的二氧乙烷,進一步分解成CO2和電子激發態的吖啶酮,當吖啶酮回到基態時發出最大吸收波長430nm的光子。
這個發光過程是十分短暫(整個過程的發生小于2秒),觸發方案必須增加內部光度計和光子探測器;另外,也可以使用配備自動進樣器的多功能酶標儀進行發光數據采集。蛋白質,多肽,抗體,核酸都可以用本產品進行標記。吖啶酯在堿性過氧化氫的激發下快速發光,因此通過收集光子可以檢測到標記化合物。
主要用于:化學發光及免疫分析、受體分析、核酸及多肽檢測等研究。
儲存條件: ﹣20℃,避光
運輸條件: 2-8℃,避光
1.配制說明
標記緩沖液:0.2M NaHCO3 (pH=9.0);
標記終止緩沖液: 10% 賴氨酸 0.2M NaHCO3 (pH=9.0)溶液;
脫鹽純化緩沖液:0.1M Na2HPO4-NaH2PO4 (pH=6.5);
吖啶酯發光液:(0.01~0.1M) NaOH+0.05% H2O2 。
2. 計算標記所用抗體(蛋白質)和吖啶酯的量:
通常設定摩爾比n(抗體): n(吖啶酯)=1:10~1:50,具體需根據氨基酸組分進行摸索調整;
配制2.5mg/ml 吖啶酯-DMSO母液,注意玻璃器皿盛放并避光;
使用0.2M NaHCO3(pH=9.0) 溶液配制0.1~0.5 mg/ml 抗體反應液 。
需要注意的是,吖啶酯標記的蛋白可以在酸性緩沖液中4℃避光存儲(注意補加疊氮鈉等防腐劑),如果儲存效果不佳,則請避光保存于-20℃或者-80℃。德晟專業生產化學發光試劑、化學發光底物和酶的顯色底物以及體外診斷試劑。我們還可以接受定制合成服務,歡迎前來咨詢訂購!