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吖啶酯化學發光分析CLIA是目前市場前景非常好的免疫分析方法,管式化學發光磁珠法中通常會用到鏈霉親和素和生物素,這里介紹CLIA中鏈霉親和素其作用。
吖啶酯的化學發光與魯米諾不一樣,魯米諾是輝光型,可長時間發光,而吖啶酯屬于閃光性,發光時間短發光迅速,通常只有數秒。吖啶酯體系在堿性條件下加入激發劑過氧化氫0.4s后發射光強度達到最大,半衰期為0.9s,2s內發光基本結束,可以實現快速檢測。吖啶酯與鏈霉親和素結合后,可使其擁有更好的性能。
鏈霉親和素在吖啶酯發光中的放大作用:
鏈霉親和素是由鏈霉菌分泌的一種蛋白質,它能與生物素發生特異性結合,它們之間的結合力是目前已知的最強的非共價鍵結合力。因為這一特性,鏈霉親和素-生物素反應體系在純化和檢測領域得到了廣泛的應用。鏈霉親和素以同源四聚體的形式存在,每摩爾的四聚體分子可結合4摩爾的生物素分子,所以在免疫檢測領域具有信號放大作用。
吖啶酯化學發光、鏈霉親和素磁珠-生物素放大反應體系包括:吖啶酯標記的抗體或抗原、生物素標記的抗體或抗原、鏈霉親和素包被帶有羧基或者Tosyl(對***磺酰基)官能團的磁珠;所述的磁珠粒徑0.1-5μm。由于生物素和鏈霉親和素是以4:1的比例像結合,所以吖啶酯-生物素-抗原抗體復合物也是以4倍的比例與鏈霉親和素結合,這樣發光信號也擴大了4倍,檢測靈敏度更高。
吖啶酯的化學發光免疫分析技術本身的靈敏度和特異性就非常高,引入了特異性結合的鏈霉親和素-生物素系統后,放大了檢測信號,使吖啶酯的CLIA有了更好的實用性。德晟致力于CLIA及磁珠的研究,已有多款吖啶酯試劑受到市場好評。