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在各種非放免疫分析方法中,化學發光免疫分析(CLIA)具有靈敏度高、檢測范圍寬、精密度好、標記物穩定、可實現全自動化、應用范圍廣等優點,以吖啶酯衍生物為發光標記物的CLIA的特點是:標記簡單、標記物穩定、不需要催化劑、自然本底低、受外界干擾因素少、信噪比高、發光體系簡單等。
吖啶酯是吖啶鹽的一個總稱,指一類可用作化學發光標記物的化學物質,吖啶酯有多個不同的系列,包括吖啶鹽DMAE-NHS、吖啶酯NSP-DMAE-NHS、吖啶鹽NSP-SA等,接下來將介紹吖啶酯DMAE-NHS的合成方法和性能、優勢介紹。
吖啶酯DMAE-NHS合成路線:
1.將4-羥基-3,5-二甲基苯甲酸與N-羥基琥珀酰亞胺溶解在N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中,在縮合劑的作用下反應得到粗產品,重結晶后得純產品;
2.將1所得產品1-((4-羥基-3,5-二甲基苯甲酰)氧基)-2,5-吡咯烷二酮與吖啶-9-羰基氯溶解在無水吡啶中,在催化劑的作用下加熱反應得到粗產品,柱層析分離提純。
3.將2所得產物與***二甲酯溶解在無水***中反應,將得到的混合物過濾,濾渣洗滌然后重結晶得到目標產物吖啶酯類化學發光底物DMAE-NHS。
DMAE·NHS的發光性能介紹
1.對DMAE-NHS發光性能的研究表明,DMAE-NHS的發光為閃光,0.4s時發光強度達到最大,發光半衰期約為0.9s,發光強度為6.11×1018cps/mol。發光啟動試劑的組成對其發光強度有影響,表面活性劑如CTAC,TritonX-100,Tween-20等能增強其發光。
2.DMAE-NHS與抗體偶聯物DMAE-NHS-Ab的發光性能相似,DMAE-NHS與Ab的分子比為2.4時其發光強度為1.8×1019cps/molAb。DMAE-NHS及DMAE-NHS-Ab具有良好的熱穩定性,4℃或冰凍下,在pH7.0的PB緩沖液中,半年后它們的發光活性或免疫活性基本沒有下降,室溫或37’C下,由于水解而降低發光活性,它們的熱穩定性隨溫度升高而降低,隨熔液pH值增大而降低,
DMAE-NHS的優勢介紹
研究結果表明,DMAE-NHS具有良好的發光性能,易與抗體偶聯,偶聯物穩定,發光體系簡單,是一種理想的化學發光免疫分析標記物,以DMAE-NHS做發光標記物建立的TSHCLIA、TSHBAS-CLIA和TT4BAS-CLIA方法,標準曲線線性好、信噪比高、檢測范圍寬、具有較高的靈敏度,良好的精密度、準確性和健全性,與IRMA方法及Ciba*ingCLIA的臨床測量值相關性良好。
吖啶酯發光體系優勢明顯,在體外診斷方面具有更好的靈敏性,目前應用吖啶酯化學發光免疫分析技術已逐漸發展為醫藥檢測、診斷分析、環境檢測、食品檢測等領域的一種趨勢。德晟科技提供質量可靠的吖啶酯、吖啶鹽產品,可滿足科研機構和試劑盒生產企業的科研、生產需求。