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許多實(shí)驗(yàn)都需要使用生物緩沖液來(lái)維持有效的pH值,因此為當(dāng)前和下游實(shí)驗(yàn)選擇正確的生物緩沖液至關(guān)zhong要。在本文中,將簡(jiǎn)要討論選擇生物緩沖液時(shí)要考慮的一些重要因素,然后討論如何準(zhǔn)備生命科學(xué)中常用的緩沖液。如下表所示,Tris、HEPES、PIPES等生物緩沖液的pH緩沖范圍數(shù)據(jù)。
生物緩沖液pH緩沖范圍
Bis-Tris:5.8-7.2
HEPES:6.8-8.2
PIPES:6.1-7.5
Tris/Tris-HCL:7.0-9.0
選擇緩沖區(qū)時(shí),重要的是要考慮每個(gè)緩沖區(qū)的優(yōu)缺點(diǎn)。首先,您計(jì)劃在實(shí)驗(yàn)中使用的試劑的pH范圍必須與您選擇的緩沖液的pH范圍一致。您可以通過(guò)查看緩沖液的pH范圍或?qū)⒕彌_液的pKa與要保持實(shí)驗(yàn)的pH值進(jìn)行實(shí)際比較來(lái)確定它們是否重合。pKa值應(yīng)在所需pH值的一個(gè)單位內(nèi)。
此外,您必須考慮濃度,生物緩沖液du性,溫度和反應(yīng)性。生物緩沖液的濃度必須足以說(shuō)明您計(jì)劃在實(shí)驗(yàn)中使用的酸或堿的量。您計(jì)劃使用的pH改變成分越多,所需的生物緩沖液濃度就越高。生物緩沖液du性非常重要,因?yàn)槟承┚彌_液可能會(huì)對(duì)正在使用的細(xì)胞產(chǎn)生du性,因此,如果不確定du性,可以在實(shí)驗(yàn)中使用生物緩沖液之前先對(duì)細(xì)胞進(jìn)行測(cè)試。還應(yīng)確保決定使用的生物緩沖液不會(huì)在實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生不需要的反應(yīng)。
如今,生物緩沖液的型號(hào)種類越來(lái)越多,并且應(yīng)用領(lǐng)域也越來(lái)越廣。導(dǎo)致市場(chǎng)上的生物緩沖液長(zhǎng)期處于供不應(yīng)求的情況,特別是Tris緩沖液長(zhǎng)期處于有價(jià)無(wú)市的處境。湖北新德晟材料有限公司專業(yè)生產(chǎn)Tris、Hepes、Pipes等緩沖劑產(chǎn)品,截至目前公司也成立數(shù)十年,對(duì)生物緩沖劑的研發(fā)生產(chǎn)有著十分豐富的經(jīng)驗(yàn)。