DyLight™系列熒 光標記是一種近年來被廣泛應用的新型熒光染料,由于具有很好的光譜寬度、更強的熒光強度,更高的光學耐受性(抗淬滅性)、對pH不敏感、分子較小而滲透性更好的優勢,越來越受到科研客戶的喜愛。DyLight™種類齊全,如Dylight 405是藍色熒光,替代Alexa 405;DyLight 549是綠色熒光,可完全替代FITC/Cy2/Alexa 488;完全替代Cy3/Rhodamin/Alexa 546/Alexa 555的Dylight 549;替代Texas Red/Alexa 594的Dylight 594;Dylight 633和Dylight 649(可替代Cy5/Alexa 647)則是更強的紅色熒光;另外,Dylight還有適配Odyssey系統的近紅外和遠紅外二抗Dylight 680和DyLight 800。下面我們來看看DyLight系列熒光的優異表現吧:
一、DyLight熒光二抗比傳統熒光標記二抗具有更高的熒光發光強度
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DyLight 488標記的抗體比Cy2 和FITC標記的更亮,與Alexa Fluor 488 標記的亮度相當。DyLight 549標記的抗體比傳統的羅丹明、TRITC等熒光亮,與Cy3 和Alexa Fluor 555亮度相當;而DyLight 594標記的抗體熒光亮度明顯強于Alexa 594標記抗體。相比較Texas Red而言,不僅更亮,而且具有更好的水溶性。
二、DyLight熒光二抗比傳統熒光及Alexa標記二抗具有更低的背景!
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左上圖為使用 FACSCalibur流式細胞儀(Becton Dickinson),分析抗-CD3和其他熒光素標記的人外周血淋巴細胞圖譜。不同顏色分別指示DyLight 488 (綠色)、FITC (黃色)、Cy2 (藍色)以及Alexa Fluor 488(紅色)標記的熒光二抗。箭頭所指處顯示Alexa Fluor 488在這個實驗中有輕微的背景。右上圖為在流式分析中,以抗-CD3和各種熒光素連接二抗標記的人外周血淋巴細胞圖譜。綠色為DyLight 649、黃色為APC、藍色為Cy5 標記的二抗。Alexa Fluor 647為紅色區域。箭頭所指處顯示Alexa Fluor 647在這個實驗中有輕微的背景。
三、DyLight熒光二抗種類更多更全
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另外,還有兩種遠紅外DyLight標記抗體,具有更低的熒光背景干擾和更強的樣本穿透力,因而更適用于細胞或組織的成像等領域的研究。艾美捷提供的進口DyLight抗體產品覆蓋各種動物種屬,包括人、小鼠、兔、大鼠等,另有3種標記的鏈親和素。
四、DyLight熒光二抗具有最高的性價比!
可能還需要考慮的一個問題是價格的問題,其實Dylight的熒光二抗與常規熒光二抗相比,具有更高的性價比,一般來說,Dylight的價格比常規二抗只高20%左右,但是Dylight的效價通常是常規熒光二抗的2-4倍左右,因此就最終的性價比,Dylight更勝一籌。舉例來說,EarthOx的 FITC標記的山羊抗小鼠IgG二抗(貨號為E031210),100μl是¥160;而相應的EarthOx的Dylight 488標記的山羊抗小鼠IgG二抗(貨號為E032210),100μl報價是¥240,但是在具體使用時,比如免疫熒光實驗,其推薦稀釋比率分別為 1:100和1:400,即100μl的FITC標記山羊抗小鼠IgG二抗(貨號為E031210)最終使用液是10ml,而100μl的Dylight 488標記山羊抗小鼠IgG二抗(貨號為E032210)最終使用液是40ml,可見,即使不考慮Dylight更高的熒光強度、更好的光學穩定性和特異性,但就價格來說,Dylight熒光二抗也具有更高的性價比。
五、DyLight熒光二抗比傳統熒光標記二抗具有更好的光學穩定性、發光更持久、更適合拍照
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從光穩定性上來說,DyLight 488與Alexa 488均表現優異,均強于FITC和Cy2;DyLight 549與Alexa 555具有相當的耐光性,稍微比Cy3強。在封片劑中加入抗淬滅劑如ProLong Gold、VECTASHIELD或含N-propyl gallate的PBS-甘油等可增加這三種熒光染料的耐光性;在可見光譜的橙-紅區域內,DyLight 549和Cy3標記的二抗在所有免疫熒光實驗中表現出最大靈敏度。DyLight 594在不含有抗淬滅劑的條件下,遠較Texas Red穩定,與Alexa594相當;在含有某些抗淬滅劑的情況下,DyLight 594同樣表現優異。
我們向您推薦美國EarthOx原裝進口的液體形式的小包裝常用DyLight系列二抗產品,以及Jackson各種規格的全系列DyLight二抗產品。
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抗體描述貨號|熒光標記 |
DyLight 405
400nm/421nm
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DyLight 488
493nm/518nm
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DyLight 549
555nm/568nm
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DyLight 594
591nm/616nm
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DyLight 649
652nm/670nm
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Goat Anti-Mouse IgG (H+L)
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E032110
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E032210
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E032310
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E032410
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E032610
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Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)
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E032120
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E032220
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E032320
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E032420
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E032620
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Rabbit Anti-Goat IgG (H+L)
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E032130
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E032230
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E032330
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E032430
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E032630
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Goat Anti-Rat IgG (H+L)
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E032140
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E032240
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E032340
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E032440
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E032640
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Goat Anti-Human IgG (H+L)
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E032150
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E032250
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E032350
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E032450
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E032650
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注:每種規格均提供100μl和500μl,2011年報價分別為¥240/¥960,最新報價請使用貨號在網站內查詢。
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大包裝DyLight二抗更劃算、種類更多!
1. 大包裝二抗種類更齊全、應用更廣泛。更重要的是,Jackson的DyLight系列種類非常多,幾乎能滿足實驗的各種需求,包括經過各種血清吸附、不同種屬來源(包括驢、兔、山羊、小鼠等)、F(ab’)2和Fab等不同片段化,以及特異性抗IgM/IgA或者抗Fab或Fc等二抗產品。下列為部分DyLight二抗列表,更多相關產品及解決方案請聯系艾美捷科技有限公司。
2大包裝二抗具有更高的性價比。以DyLight 488山羊抗小鼠二抗為例,Jackson的(貨號為115-485-003)規格為2mg,可配制成1.3ml,與EarthOx的相應二抗相比,是其100μl包裝價格的6倍,含量卻增加了12倍!另外,
由于DyLight熒光二抗本身分子量較小,同一個二抗分子上可以標記更多的DyLight熒光物,比如與相同規格的FITC山羊抗小鼠二抗(貨號為115-095-003)相比,價格雖然增加了25%,效價卻高了100%!這還沒有考慮DyLight具有更好的抗萃滅性、靈敏度以及信噪比!
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*標有“(min X…Prot)” 字樣的抗體是經過了圓括號中所標的物種的IgG和/或血清蛋白的吸附處理的二抗。與一個物種反應的二抗可能與其他物種發生交叉反應,除非這類抗體經過其他物種的吸收實驗。而經過了相關物種的血清蛋白吸附便可以降低與該物種的IgG的非特異性結合能力。但是需要注意的是,這種經過針對物種吸附處理的抗體識別相近物種單抗的表位數量也減小了,其識別單抗的能力也很弱。
# 這種F(ab’)2片段形式的二抗是用胃蛋白酶消化IgG去除Fc部分,剩下兩個靠二硫鍵連接的結合抗原的Fab部分,依然是二價的;該抗體可避免與Protein A /G或與Fc受體的結合, 還由于其分子本身比較好,更容易滲透入細胞組織結構內而靈敏度更高 。
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